国产a网-国产a视频精品免费观看-国产a区-国产a免费观看-天天狠天天操-天天好比网

網站導航

技術文章

當前位置:主頁 > 技術文章 > PCR新手指南:快速PCR技術與快速PCR儀的區別
PCR新手指南:快速PCR技術與快速PCR儀的區別
更新時間:2015-05-06 點擊次數:1334

在PCR儀上完成一個PCR反應所需要的時間決定于以下幾個因素:
1、模塊升溫和降溫時間
2、模塊與PCR管內溫度平衡時間
3、延伸時間
4、循環次數
下面就以上幾點做一點分析,以便大家了解快速PCR技術與快速PCR儀的區別。

1、模塊升溫和降溫度時間
PCR儀一般會標明升溫速度和降溫速度,但標的大多是zui大變溫速度,也就是說是瞬間達到的速度。而與實驗相關的平均升降溫速度只有極少量廠家標明。以平均2度和4度(能做到平均升降溫4度的儀器極少)來計算,從95度降到55度,分別是20秒和10秒,每一個循環差20秒鐘。以一般35個循環來計算,影響實驗時間700秒,也就是不到12分鐘。實際還要考慮過沖問題,影響時間還會少些。

2、模塊與PCR管內溫度平衡時間
模塊溫度達到后,PCR管內的溫度遠沒有達到(塑料和水的導熱系數比鋁塊差300倍以上),需要時間來使二者達到平衡。一般有四種辦法來減少這一時間,一是讓模塊溫度過沖,在管內溫度快達到時降到目標溫度,但太高的過沖可能造成實際溫度過沖,影響PCR反應結果;二是減少PCR反應液的體積,但體積變小時PCR反應的可靠性會降低;三是降低PCR管的厚度,但太薄時強度不夠;四是增加PCR管與模塊貼附程度。

3、延伸時間
延伸時間與PCR產物的長度和DNA聚合酶的合成速度有關。如果PCR產物長度少于100bp時,可能考慮將延伸時間變為0(即兩步法);采用高速的DNA聚合酶也是常用的方法,但并不是所有PCR實驗都可以用高速的DNA聚合酶。

4、循環次數
循環次數與模板量及檢測要求相關。

所謂快速PCR技術是將快速PCR儀與超薄管(或特殊貼附技術)以及高速DNA聚合酶等技術整合在一起,可達到較短時間完成PCR反應。而一些廠家在向用戶推銷PCR儀時,不去說明快速PCR技術,只強調PCR儀速度快(大都用zui大升降溫速度來HuYou用戶)。好像買了快速PCR儀后,原來1個半小時的擴增時間變會縮短成半小時似的。而用戶采購了快速PCR儀后才發現并不那么回事。有不少用戶采用快速模式根本就做不出好的實驗結果。特別是進行多重PCR擴增的用戶,如*系統用于身份鑒定的試劑。

快速PCR技術與快速PCR儀是兩回事。快速PCR儀zui多只能縮短PCR反應時間10分鐘左右,要實現真正的快速PCR反應,還需要其他一些努力。大多數用戶根本就不需要快速PCR技術。

聯系方式

郵件:sh-jiapeng@163.com
傳真:021-36162369
郵編:200444
地址:上海市真陳路1398弄15號
在線客服 聯系方式 二維碼

服務熱線

021-66030766

掃一掃,關注我們

主站蜘蛛池模板: 亚洲最新| 国产精品一区在线观看| 欧美福利在线| 欧美 亚洲 一区| 性欧美大战久久久久久久野外黑人| 欧美日韩视频一区二区三区| 激情午夜婷婷| 免费在线观看一区二区| 国产区视频在线观看| 欧美精品久久久久久久久大尺度| 性xxxx欧美| 国产精品成人久久久久久久| 国产成人精品免费午夜app| 国产欧美精品一区二区三区四区| 久久久久久久国产精品毛片| 91一区二区在线观看精品| 中文字幕一区久久久久| 国产福利久久青青草原下载| 添逼动态图| 精品久久久久久久久中文字幕| 欧美精品一区二区三区免费观看 | 免费观看一级成人毛片| 国内精品视频免费观看| 国产第10页| 国产成人精品一区二区免费| 国产精品第1页| 国产特黄| 国产日韩视频在线| 天美传媒精品一区| 视频亚洲一区| 亚洲另类中文字幕| 亚洲国产精久久久久久久| 国内精品免费| 久久午夜一区二区| 欧美成人久久电影香蕉| 国产精品亚洲综合一区| 日韩欧美在线视频观看| 精品视频一区二区三区| 日韩极品视频| 91久久精品一区二区三区| 伊人网免费视频|